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科学合理的冷冻高聚蛋白胨细胞一直是业内人士追求的课题

2018-09-27      205
   科学合理的冷冻高聚蛋白胨细胞一直是业内人士追求的课题
  高聚蛋白胨,英文名Hipolypepton,也可称为多聚蛋白胨,聚蛋白胨, 可配制各种微生物培养基,用于细菌的培养、分离、增殖、鉴定,以及无菌试验培养基、厌氧菌培养基等细菌生化特性试验用培养基配置。
  高聚蛋白胨细胞的冷冻保存一直是生物科技以及医疗行业的难题,如何克服冷冻过程中的种种弊端,科学合理的冷冻高聚蛋白胨细胞一直是业内人士追求的课题,其实高聚蛋白胨细胞的冷冻技术也并不复杂。
  关于高聚蛋白胨细胞的冷冻保存方法如下:
  1·传统方法: 冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-80℃16~18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1小时,以防止胞内冰晶过大,造成高聚蛋白胨细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
  2·程序降温:利用已设定程序的等速降温机以-1~-3℃/分钟之速度由室温降至(-80℃以下)-120℃,再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。高聚蛋白胨冷冻前24-48小时更换半量或全量培养基,使细胞处于指数生长期。
  高聚蛋白胨配制冷冻保存溶液(使用前配制):另取一离心管,加入培养基、血清,逐滴加入二甲基亚砜(DMSO)至20%浓度,即制成双倍的冻存液,置于室温下待用。
  有关高聚蛋白胨的培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基除了高聚蛋白胨还含有抗菌素和色素。
  按所用原料不同,可分为两类:应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基;应用化学药品配成并标明成分的,高聚蛋白胨称为合成培养基或综合培养基。化学试剂中的培养基,大多为合成培养基。由于高聚蛋白胨液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。高聚蛋白胨培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般高聚蛋白胨培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般高聚蛋白胨培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的高聚蛋白胨培养基(如组织培养基),高聚蛋白胨较长时间的贮存,必须放在2——6摄氏度的冰箱内。
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